降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)程序是決(jue)定冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)效(xiao)(xiao)(xiao)果的(de)(de)(de)(de)(de)(de)另一(yi)(yi)個關鍵因(yin)(yin)素。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)內(nei)(nei)部(bu)易形(xing)成冰(bing)晶對細(xi)(xi)胞(bao)(bao)造成損傷；若降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)速度過(guo)(guo)慢(man)，會因(yin)(yin)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)外(wai)部(bu)介質的(de)(de)(de)(de)(de)(de)水分(fen)結(jie)冰(bing)而導(dao)致細(xi)(xi)胞(bao)(bao)過(guo)(guo)度脫水死亡。因(yin)(yin)為(wei)(wei)-60~0℃的(de)(de)(de)(de)(de)(de)低(di)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)對細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)損傷**，因(yin)(yin)此要選擇(ze)合適(shi)(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)程序，讓(rang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)在(zai)(zai)能(neng)夠適(shi)(shi)應(ying)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)度驟變的(de)(de)(de)(de)(de)(de)前提下，迅速安全地通過(guo)(guo)這(zhe)個溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)度危險區，提高冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)效(xiao)(xiao)(xiao)果。根據研究的(de)(de)(de)(de)(de)(de)數據和(he)相關報道，在(zai)(zai)精(jing)超低(di)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)前先于(yu)4℃平衡(heng)15~25min，再于(yu)距離液(ye)氮(dan)面(mian)15cm處停留(liu)5min，在(zai)(zai)距離液(ye)氮(dan)面(mian)5cm處停留(liu)10min，可(ke)使櫛(zhi)(zhi)江珧、近(jin)江牡(mu)蠣(li)、馬氏珠母(mu)貝等精(jing)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)效(xiao)(xiao)(xiao)果達到**。樣品(pin)體(ti)積(ji)(ji)對冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)效(xiao)(xiao)(xiao)果也有(you)影響。樣品(pin)體(ti)積(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)不同可(ke)能(neng)影響了(le)熱的(de)(de)(de)(de)(de)(de)交換，體(ti)積(ji)(ji)小的(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)快，體(ti)積(ji)(ji)大的(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)慢(man)，這(zhe)間接(jie)造成了(le)降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)條件的(de)(de)(de)(de)(de)(de)差(cha)異，導(dao)致精(jing)活率不一(yi)(yi)樣。關于(yu)雙殼類(lei)適(shi)(shi)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)體(ti)積(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)探討(tao)，朱豪磊(lei)認為(wei)(wei)香港牡(mu)蠣(li)在(zai)(zai)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)體(ti)積(ji)(ji)為(wei)(wei)0.75mL時復蘇效(xiao)(xiao)(xiao)率高；李純(chun)認為(wei)(wei)紫貽貝、櫛(zhi)(zhi)孔扇(shan)貝和(he)菲(fei)律賓蛤(ha)仔的(de)(de)(de)(de)(de)(de)適(shi)(shi)精(jing)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)體(ti)積(ji)(ji)分(fen)別為(wei)(wei)0.4、1和(he)1mL。有(you)研究的(de)(de)(de)(de)(de)(de)數據顯示(shi)，櫛(zhi)(zhi)江珧和(he)近(jin)江牡(mu)蠣(li)精(jing)在(zai)(zai)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)體(ti)積(ji)(ji)為(wei)(wei)1.0~1.4mL的(de)(de)(de)(de)(de)(de)范圍內(nei)(nei)保存(cun)效(xiao)(xiao)(xiao)率高。分(fen)析以上研究結(jie)果不同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)原(yuan)因(yin)(yin)，一(yi)(yi)方面(mian)是物(wu)種間的(de)(de)(de)(de)(de)(de)差(cha)異，更重(zhong)要的(de)(de)(de)(de)(de)(de)是降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)程序存(cun)在(zai)(zai)差(cha)異。柯亞夫等認為(wei)(wei)，不同體(ti)積(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)保存(cun)時要對應(ying)不同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)降(jiang)(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)方法(fa)，以達到適(shi)(shi)保存(cun)效(xiao)(xiao)(xiao)果。1.0~1.4mL的(de)(de)(de)(de)(de)(de)樣品(pin)體(ti)積(ji)(ji)適(shi)(shi)合櫛(zhi)(zhi)江珧和(he)近(jin)江牡(mu)蠣(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)研究結(jie)果，雙殼類(lei)精(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)超低(di)溫(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)(wen)冷(leng)(leng)(leng)凍(dong)(dong)保存(cun)起始于(yu)20世紀(ji)70年代。