怎么在液氮(dan)罐(guan)里(li)儲存細(xi)胞(bao)呢?凍存細(xi)胞(bao)的步驟會影響(xiang)到(dao)細(xi)胞(bao)復蘇時的活力，所以在使用液氮(dan)罐(guan)儲存細(xi)胞(bao)時應小心并(bing)按(an)步驟操作：

1、預先(xian)配制凍存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清(qing)，4℃冰(bing)箱保存預冷;

2、用(yong)胰(yi)酶(mei)對細胞(bao)進行消(xiao)化(hua)(hua)：倒去(qu)培養瓶中(zhong)的(de)培養基或用(yong)槍小心(xin)吸去(qu)培養板中(zhong)的(de)培養基，PBS沖洗兩次，用(yong)胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua)(hua)細胞(bao)(盡可能溫和);

3、再次用(yong)*培養液(ye)懸浮細胞(bao)，將預冷的凍存液(ye)加入消化*的細胞(bao)中，用(yong)滴管(guan)輕(qing)輕(qing)吹打混勻(yun)。

4、在(zai)每支凍存管中(zhong)加入1ml細(xi)胞液，密封后標(biao)記凍存細(xi)胞名(ming)稱和(he)凍存日期。

5、凍(dong)存步驟的(de)細致直接(jie)關(guan)系到細胞復蘇時的(de)活(huo)力，如果有程序降溫器(放(fang)在-80℃冰箱過夜，放(fang)入液(ye)氮罐**;或者可以在4℃;