自體(ti)(ti)T淋巴細(xi)(xi)胞(bao)免(mian)疫(yi)(yi)治(zhi)療(liao)已(yi)列為(wei)正式臨(lin)(lin)床治(zhi)療(liao)項(xiang)目(mu)，T細(xi)(xi)胞(bao)的體(ti)(ti)外誘導(dao)及免(mian)疫(yi)(yi)治(zhi)療(liao)技(ji)術已(yi)趨于成熟，并取得(de)(de)良(liang)(liang)好的臨(lin)(lin)床療(liao)效，然而成功有效的過繼性免(mian)疫(yi)(yi)治(zhi)療(liao)關鍵在于獲得(de)(de)足量(liang)、高活性的免(mian)疫(yi)(yi)效應細(xi)(xi)胞(bao)。免(mian)疫(yi)(yi)治(zhi)療(liao)成功的關鍵之一是要獲得(de)(de)足夠(gou)數量(liang)和質量(liang)良(liang)(liang)好的T細(xi)(xi)胞(bao)。因腫瘤(liu)病人往(wang)往(wang)免(mian)疫(yi)(yi)系統(tong)受抑，取自患者的PBMNC。

在數(shu)量和(he)質量上給體外擴增免(mian)疫(yi)(yi)效應細胞(bao)(bao)(bao)帶來了(le)困(kun)難，這(zhe)是(shi)目前臨床上常見的現象(xiang)，影響了(le)療效。免(mian)疫(yi)(yi)細胞(bao)(bao)(bao)需多次輸注才能(neng)達到較好的治療效果，多數(shu)醫療單(dan)位(wei)利用(yong)血(xue)細胞(bao)(bao)(bao)分離機采集(ji)單(dan)個核細胞(bao)(bao)(bao)，而這(zhe)種采集(ji)方(fang)法價格昂(ang)貴(gui)，多次采集(ji)給患者帶來心理(li)及身體的痛苦。自增壓液(ye)氮罐(guan)

在免疫細胞療法技術成熟的今日，如果能預先儲存健康的免疫細胞，在日后有需要時加以應用，不但可以實踐疾病預防的概念，更能提升預防醫學的價值。PBMNC分離和凍存流程既是一種經濟實用的獨立操作方法。Ficoll是人工分離淋巴細胞的重要環節，選用高質量的試劑可使細胞分層集中而清晰，能**程度獲取純凈的PBMNC。經深低溫長期保存的PBMNC可以保持其原有的活性，其中T淋巴細胞的增殖能力未受明顯影響。
凍(dong)存(cun)前細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)活力(li)達(da)到(dao)99.6（±0.4%）%，淋巴細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)回(hui)(hui)收率58.4%（±6.52%），符合臨(lin)(lin)床T細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)體(ti)外誘(you)導(dao)及(ji)培養的(de)(de)要求。含10%DMSO和右旋(xuan)糖酐的(de)(de)凍(dong)存(cun)保護液(ye)中分別(bie)添加(jia)80%無血清培養液(ye)和80%自(zi)體(ti)血漿均(jun)顯示出良(liang)好的(de)(de)冷凍(dong)保護效果，在－196℃液(ye)氮中保存(cun)其2年仍能(neng)夠(gou)保持89.7%±3.82%的(de)(de)活力(li)，為(wei)下一步臨(lin)(lin)床擇機實施抗腫瘤(liu)免(mian)疫效應(ying)(ying)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)誘(you)導(dao)、擴(kuo)增(zeng)以及(ji)回(hui)(hui)輸治(zhi)療提供了便利條(tiao)件。建立的(de)(de)自(zi)體(ti)血漿冷凍(dong)保護流程亦適合凍(dong)存(cun)經誘(you)導(dao)、擴(kuo)增(zeng)后的(de)(de)免(mian)疫效應(ying)(ying)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，證(zheng)實使(shi)用(yong)冷凍(dong)過(guo)的(de)(de)外周(zhou)血單個核細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)能(neng)夠(gou)定向誘(you)導(dao)生成AIL細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，并且(qie)其擴(kuo)增(zeng)能(neng)力(li)、細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)純(chun)度和細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)毒(du)活性均(jun)與新鮮(xian)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)直接誘(you)導(dao)生成的(de)(de)AIL細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)沒(mei)有明顯的(de)(de)差別(bie)。冷凍(dong)的(de)(de)外周(zhou)血單個核細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)誘(you)導(dao)的(de)(de)AIL細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)應(ying)(ying)用(yong)于臨(lin)(lin)床腫瘤(liu)治(zhi)療提供了基(ji)礎(chu)，可根據腫瘤(liu)患者的(de)(de)治(zhi)療方案隨(sui)時復蘇細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，使(shi)現有的(de)(de)抗腫瘤(liu)免(mian)疫治(zhi)療方法更加(jia)靈活多變(bian)。